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解放双手篇|都2023年了,你还在用手动计数?

发布日期: 2023-07-19

细胞计数作为医学检验的常用手段之一,也是细胞学实验室的一个基本技能。我们想了解细胞的生长情况时,除了直接观察细胞形态以外, 绘制细胞生长曲线 、计算细胞倍增时间应该就是广泛采用的评价指标了。 但其实使用血细胞计数板手工计数细胞过程十分繁琐,对实验者操作者的要求也比较严格。

细胞计数的常见方法主要有手动计数及自动计数。本期阿显为您列举手工计数的操作要点以及自动计数的便捷高效之处,供您按照自身实际情况选择!

手动计数操作要点
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1.计数板需要清洗干净使其干燥,不能有油脂或者灰尘,盖玻片亦如此,不干净的计数板严重影响计数结果的准确性。
2.提前预估细胞量,细胞浓度太低误差大,细胞浓度太大容易数花眼。最好使其浓度在0.5-5x106个/mL,也就是每个计数室50-500个细胞,细胞数目过多,则需要进一步稀释;细胞数目过少,则需要离心再悬浮。
3.尽可能使细胞分离成单个,无团块无杂质;计数前快速吹打均匀,尤其是多次取样计数时更要注意每次都要混匀,操作尽量迅速。
4.细胞液滴加到计数室再盖盖玻片,亦可先盖玻片,从侧面通过液体毛吸作用到达计数室,液体太多容易测流到计数板小沟,细胞容易被流走;液体太少容易在计数室或者附近形成空泡。如出现以上情况,则需准备细胞和计数板重新计数。
5.数细胞的原则是只数完整的细胞,若少量细胞聚集成团,只按照一个细胞计算;如果细胞压在格线上,则只计上线,不计下线,只计右线,不计左线。
6.如果细胞需要台盼蓝染色,必须充分混匀并且不要忘记计算时乘以倍数
7.滴加细胞过程中,滴加后移动计数板以及计数过程中都要保持计数板水平不晃动,防止细胞液体侧流带动细胞流失或者局部聚集。
8.建议细胞计数板上下两室都计数然后取平均或者多次计数取平均,准确的计数应该是多次计数结果差别很小,或者稀释一定倍数后计数结果依然吻合

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